Pathology 관련 서비스
1. 조직 분석 용역: 고객이 제공하는 인체 또는 동물(유전자 변형 생쥐, 쥐, 토끼 등)의 조직을 염색하거나 세포 내에 포함된 각종 유기, 무기물질을 대상으로 염료를 포함한 여러 화학물질을 사용하여 염색을 시행한다. 이는 Animal gross, Tissue Fixation and perfusion, Tissue Processing and Embedding, Cutting, H&E stain and Special stain 등을 포함한다.

(1) Gross (Mouse, Rat)
고객이 제공한 Knockout mouse, rat, human 등 장기 또는 조직 괴로부터 조직 표본을 제작하기에 적당한 크기나 형태로 조직 편을 잘라낸다. Mouse 조직의 경우 장기가 작으므로 한 cassette 에 모아서 fixation 할 수 있으며, 이 과정은 pathologist 의 육안소견 (gross finding) 과 현미경 소견 (microscopic finding) 을 종합하여 report 에 기재된다.
※ 소요시간 : 한 마리 당 30~40분

(2) Fixation (Formalin, Bouin’s solution, 4% Formaldehyde)
조직의 손상 방지 및 장기간의 보존 매염 등을 위하여 formalin fixation 을 실시한다. Rat 의 경우 장기 (Lung, Brain) 가 대체적으로 크므로 perfusion 을 하여 내부의 생화학적, 형태학적으로 고정이 됩니다. 이는 기술적인 technic 을 요하므로 추가 비용이 부담된다.
※ 소요시간 : 24 시간 (실온) , 2~3 시간 (60℃ oven) ? cassette 수는 무제한. 단, 뼈 같은 단단한 조직은 탈회를 해야 하므로 시간이 더 소요될 수 있음.

(3) Decalcification (Bone, 치조골, Skeleton)
칼슘이 침착 된 조직을 대상으로 칼슘을 제거하여 박절하기에 적합하도록 처리하는 과정이다. 탈회 액에는 보통 산이나 EDTA 가 사용되는데 산은 조직 내 칼슘과 반응하여 용해성 칼슘 형태로 바뀌며, EDTA 는 칼슘 이온과 선택적으로 결합하여 칼슘을 제거한다. 탈회 액은 진단의 신속성, 칼슘의 침착 정도, 조사 범위 및 사용될 염색법 등을 고려 하여 적절하게 선택한다.
※ 소요시간 : 12 ~ 24시간

(4) Processing (Paraffine 침투 과정)
Auto Processor 를 이용하여 formailn fixation 된 조직에서 수분을 제거하고 paraffin 을 침투시켜 조직을 cutting 하기 좋은 형태로 만들어 준다.
※ 소요시간 : 14 ~ 16시간

(5) Embedding (Paraffine 블록 제작 과정)
조직의 외부를 paraffin 을 이용하여 사각형 block 으로 만들어 cutting 시 조직을 고정할 수 있도록 한다.
※ 소요시간 : 20분 (10 cassette 당)

(6) Cutting (Paraffin section / Frozen section)
Block으로 만들어진 조직을 얇게 박절하여 stain 할 수 있도록 slide 를 만든다.
※ 소요시간 : 1시간 (40 cassette 당)

(7) Routine stain (H&E stain)
만들어진 slide 를 이용하여 여러 단계적으로 Hematoxylin and Eosin (H&E) stain 을 실시한다.
※ 소요시간 : 2 ~ 3 시간 (Manual / Auto stainer)

(8) Special stain
- Masson’s trichrome stain
- Periodic acid Schiff (PAS) stain
- Toluen blue
- TUNEL (Apoptotic cell stain)
- Vorhoeff elastic fiber
- Wright & Giemsa stain



2. Tissue bank: 각종 인체 또는 동물의 조직을 확보하는 것을 목표로 한다.
Immunohistochemistry stain 서비스 (하이퍼링크 IHC소개)
조직 내에 존재하는 항원을 검출하기 위해 항체를 사용하는 방법으로 특이도와 감도가 매우 높아 다양한 항체를 이용하여 연구 또는 진단 목적으로 활용할 수 있다. 면역조직 화학 염색법은 조직의 어떤 부위에서 단백질이 발현 되는가를 정확히 육안으로 관찰하는 일종의 분석검사이다. 면역조직화학검사는 지금까지 형태학적인 소견만으로는 진단을 내리기 어려운 점을 보완해 주고 있으며, 형태학적 변화가 미세하거나 경계성 병변 (borderline lesion) 인 경우 정확한 진단을 판단 할 수 있도록 객관적인 정보를 제공하여 주고 있다



Tissue microarray 제작 및 TMA IHC stain 서비스 (하이퍼링크 TMA제작)
조직 미세배열 (Tissue microarray) 은 하나의 슬라이드에 여러 환자의 조직을 함께 넣어 분석하는 방법으로 연구의 효율성을 크게 높이고 각종 high throughput research 와 병리학적 연구에 활발히 이용되고 있다.
특히 cell signaling molecule 같은 발현조직이 불확실한 경우 여러 조직을 동시에 검사하는 High throughput 개념의 Tissue array 가 반드시 필요하다
Ovarian Cancer, Gastric Cancer, Colon Cancer, Gall Bladder Cancer 등 다양한 tissue microarray (TMA) 제작 할 수 있다.
IHC 의 Quality control 이 훨씬 용이 ? 염색할 조직이 많아지면 동일 조건에서 똑같이 염색하기 힘듬. TMA 를 사용하면 semi-quantitive analysis 가 가능함.
기존의 일반 조직을 여러 장 염색 할 때 보다 antibody 의 양이 크게 절약 됨.
시간과 노력이 크게 절약 됨.
조직의 가장 자리 또는 슬라이드의 가장 자리는 염색이 진하게 되거나 염색이 잘 안되는 현상 (Edge effect)이 발생하며, 슬라이드 중심부와 가장자리의 염색 정도가 다르게 될 우려가 있다. 이를 해결하기 위해서 Autostainer 가 필히 필요하다.
TMA slide 를 manual 방법으로 염색하기 매우 곤란함.
TMA 블록을 제작하고 슬라이드 제작하기 힘드며, 비용이 많이 듬.



Cross Reactivity Test 서비스
항체치료제 개발시 조직 교차 반응성 시험은 반드시 요구되는 사항으로, IND(Investigational New Drug) application시 필수사항이다. 비표적 조직들에 대한 항체의 결합은 결국 항원에 대한 항체의 반응이며, 이들은 여러 가지 기전을 통하여 일어날 수 있지만 모두 특이적(specific) 인지와 비특이적(nonspecific) 인지 둘 중 하나에 속한다. 특이적 인지는 신호(signal)에 해당하고 비특이적 인지는 잡음(noise)에 해당한다고 할 수 있는데, 특이적 인지는 다시 협의의 cross-reactivity와 polyspecificity로 나뉠 수 있다. 항원-항체 반응 중 cross-reactivity는 wildtype-derived key residues에 의한 상호작용으로 동일 구조의 epitope를 동일한 방식으로 항체가 인지하는 것이다.
반면에 polyspecificity는 주 epitope과는 관계가 없는 구조의 epitpoe을 다른 방식의 상호작용으로 인지하는 것으로 특정 항체의 또 다른 항원에 대한 특이적 결합이다. 그러나 대부분 학자들은 cross-reactivity와 polyspecificity의 구분없이 “교차반응(cross-reactivity)”로 통칭하여 명명하고 있다.
특정 재조합 항체가 치료용으로 개발되기 위하여 우선적으로 고려되어야 할 사항은 표적이 아닌 세포에서 항체가 인지하는 epitope이 발현되느냐의 여부이다. 이러한 항체의 비표적(non-target) 조직들에 대한 결합은 부작용 또는 독성(toxicity)을 나타낼 가능성을 시사함으로 전임상 실험에 필수적이다.
미국 식품의약 안전청에서 치료용 항체의 in vitro preclinical cross-reactivity test 를 위해서는 적어도 3명의 인간에서 채취한 32종류의 인체 동결절편 조직에서 면역조직화학을 수행하는 것을 권장하는데 이는 많은 항체들의 경우에 있어서 파라핀 포매된 조직에서는 면역 조직 화학 염색이 불가능하기 때문이다.

Microdisection 서비스 (DNA & RNA 추출용)